Общие технические вопросы инъекций в исследовательских и верификационных процессах (2)

Вопросы и ответы —————————————————————————————————————————————————

21. Можно ли узнать метод тестирования уровня контаминации и термостойкости (D-значение) микроорганизмов перед стерилизацией?
О: Уровень микробной контаминации обычно определяется методом мембранной фильтрации, после чего микроорганизмы переносятся на поверхность твердой питательной среды, культивируются и подсчитываются. Объем фильтрации и количество задержанных микроорганизмов должны быть достаточными для обеспечения достаточной скорости обнаружения (достаточной производительности фильтрации) и подсчета (слишком большое количество задержанных микроорганизмов для подсчета).

22. Как рассчитать количество инокулята в зависимости от D-значения?
О: Расчет количества инокулята спор Ni＝10Do(lgNo+6)/Di
Ni - количество термотолерантных спор в биологическом индикаторе; No - предел микробной контаминации перед стерилизацией; Do - максимально допустимое D-значение контаминирующих микроорганизмов; Di - D-значение термотолерантных спор биоиндикатора.

23. Для окончательно стерилизованных продуктов методом остаточной вероятности, если количество микроорганизмов в каждой партии ограничено перед стерилизацией, а время испытания составляет 72 часа, в то время как фактический непрерывный производственный цикл значительно короче 72 часов, является ли результат теста лишь ориентировочным показателем уровня асептической гарантии стерилизованного продукта?
О: Очевидно, что результаты теста на содержание микроорганизмов перед стерилизацией значительно отстают от производственного процесса и не предназначены для промежуточного контроля текущей партии продукции.
Значение проверки: во-первых, оценка уровня асептической гарантии данной партии продукции; во-вторых, после накопления данных о содержании микробов перед стерилизацией за длительный период для многих партий, можно в целом оценить состояние микробной контаминации каждого этапа производственной системы перед стерилизацией, чтобы определить, может ли производственная система эффективно контролировать микробную контаминацию на хорошем уровне и нуждается ли она в улучшении.

24. Можно ли узнать метод исследования видового состава и количества микроорганизмов? Необходимое оборудование? Если используется метод остаточной вероятности, необходимо ли определять уровень микроорганизмов в производственном процессе, и насколько это увеличит затраты? Как крупному производителю инфузионных растворов следует ли создавать специализированную микробиологическую лабораторию для определения уровня микробной контаминации перед стерилизацией методом остаточной вероятности?
О: Степень микробной контаминации, то есть количество, может быть определена в соответствии с методом испытания на предельные количества микроорганизмов, указанным в фармакопее; видовой состав микроорганизмов может быть определен по следующим аспектам:
1) Наблюдение за морфологией колоний невооруженным глазом;
2) Морфология и подвижность под микроскопом;
3) Общий биохимический тест: окраска по Граму или тест с 3% KOH;
4) Биохимическая идентификация (то есть тест API) для определения вида.
При использовании метода остаточной вероятности следует определять уровень микробной контаминации продукта перед стерилизацией, включая тест на кипячение контаминированных бактерий (например, 100 ℃, 15 минут) и подсчет микроорганизмов.
Микробиологическая лаборатория необходима производителям инъекционных препаратов, и ее основные функции должны включать испытание на предельные количества микроорганизмов сырья и вспомогательных материалов, испытание на микробную контаминацию перед стерилизацией, асептический тест продукта, тест на бактериальные эндотоксины, динамический контроль производственной среды (подсчет частиц воздуха, летающих и осевших бактерий). Квалифицированные лаборатории также могут выполнять следующие работы: идентификация микроорганизмов (рекомендуется проводить API-идентификацию в центральной лаборатории группы), калибровка биологических индикаторов (то есть определение D-значения, рекомендуется проводить эту работу в центральной лаборатории группы предприятий).

25. Необходимо ли подтверждать процесс стерилизации для метода перестерилизации? В чем разница между процессом исследований и разработок продукта и подтверждением в фактическом производстве методом остаточной вероятности?
О: Конечно, подтверждение необходимо. Статья 83 Приложения к GMP ЕС: все процессы стерилизации должны быть подтверждены. Метод остаточной вероятности - это проектирование процесса стерилизации, который сам по себе нуждается в проверке и подтверждении.

26. Гарантирует ли метод перестерилизации отсутствие необходимости в испытаниях на микробный вызов?
О: Суть метода перестерилизации заключается в снижении количества микроорганизмов в продукте на 12 порядков, а испытание на микробный вызов призвано доказать, что остаточная вероятность микроорганизмов не превышает 10-6, поэтому метод перестерилизации не может проводить испытания на микробный вызов.

27. Подлежит ли окончательно стерилизованный продукт отдельной проверке оборудования для каждого вида, заявленного на регистрацию? Можно ли проверить оборудование только один раз, а другие виды использовать совместно? Можно ли не прикреплять данные проверки оборудования к данным проверки вида, а использовать их только для архивных ссылок?
О: Окончательно стерилизованный продукт не нуждается в отдельной проверке для каждого вида, заявленного на регистрацию. Если зарегистрированный вид использует те же или более низкие условия стерилизации, проверка оборудования может проводиться только при условии стерилизации при более высокой температуре; данные проверки оборудования для условий стерилизации вида также должны быть приложены к данным проверки вида.

28. Можно ли для процесса стерилизации лекарственных форм, не являющихся растворами, полутвердых или порошкообразных инъекций, рассчитать значение, аналогичное F0? Можно ли рассчитать SAL? Каковы конкретные положения?
О: Нет, но можно рассчитать SAL. См. дерево решений выбора процесса стерилизации ЕС.

29. Что касается теста на заполнение питательной среды, проводится ли он для производственной линии или для заявленных продуктов (для проверки каждый продукт должен быть заполнен в трех партиях)?
(1) Может ли проверка производственной линии заменить тест на заполнение заявленного продукта (аналогичные виды)?
(2) Какая среда необходима, тиогликолат и модифицированный Мартин?
(3) Требуется ли три партии тестов на заполнение для различных спецификаций упаковки при инспекции GMP?
О: (1) Моделирующий тест на заполнение питательной среды должен проводиться в зависимости от различных продуктов, спецификаций упаковки и форм упаковки. Например, если продукт представляет собой порошкообразную инъекцию, то при моделирующем тесте на заполнение среды обычно сначала заполняется жидкая среда, а затем асептический порошок моделируемого продукта (например, асептический порошок ПЭГ); если асептическая инъекция или лиофилизированная порошкообразная инъекция, достаточно заполнить только жидкую среду; если спецификации упаковки составляют 2 мл, 5 мл, 10 мл, то даже для одного и того же продукта необходимо провести собственный моделирующий тест на заполнение среды. Если упаковка выполнена в виде флаконов или других форм (например, предварительно заполненный шприц, ампула), то из-за использования различных производственных линий следует проводить моделирующие тесты на заполнение питательной среды соответственно.
В конкретной работе, учитывая, что моделирующий тест на заполнение среды фактически является системной проверкой всей производственной линии, включая производственное оборудование, окружающую среду и действия персонала и т. д., если моделирующий тест на заполнение среды проводится в самых неблагоприятных условиях, то есть бутылка самая большая, скорость заполнения самая медленная, персонала больше всего, время дольше, чем обычное производственное время и т. д., то моделирующий тест на заполнение среды для каждого продукта, каждой спецификации также можно не проводить; если условия не являются самыми неблагоприятными, то его следует проводить в соответствии с продуктом.
(2) Для культивирования грамположительных и грамотрицательных бактерий, дрожжей и плесневых грибов обычно используется универсальная питательная среда, например, среда на основе соевого триптона; анаэробная среда используется только в особых случаях.
(3) Только при первой проверке для каждой спецификации требуется три последовательных успешных теста на заполнение имитационной среды, а затем два раза в год по одному тесту на заполнение имитационной среды.

30. Можно ли наблюдать асептический эффект фильтра в процессе дезинфекции и установки при проведении теста на заполнение среды после стерилизации среды перед заполнением, а затем фильтрации через мембранный фильтр?
О: тест на заполнение среды — это исследование степени асептической гарантии всех этапов, включая асептическую фильтрацию. Рекомендуется готовить среду и использовать ее непосредственно в процессах асептической фильтрации и последующего наполнения. На практике следует избегать попадания нерастворимых частиц, которые могут закупорить фильтр.

31. Сколько партий тестов на заполнение среды проводятся дважды в год для перепроверки?
О: для ежегодной перепроверки продукта обычно проводятся тесты на заполнение среды дважды в год, каждая партия.

32. Время стерильной культуры в издании Китайской фармакопеи 2005 года изменено на 14 дней. Необходимо ли также продлить тест на культивирование при двух температурах после имитации и заполнения среды?
О: общее время культивирования не должно быть менее 14 дней. Его можно разделить на две температуры (22,5 градуса и 32,5 градуса) не менее чем на 7 дней или одну температуру (22,5 градуса) для прямой культуры.

33. Пожалуйста, объясните, какой статистический метод используется и как вычисляется таблица.
О: подробное объяснение расчетной формулы можно найти в книге «Руководство по проверке производства лекарственных средств (2003)» (издательство химической промышленности), составленной Департаментом надзора за безопасностью лекарственных средств и Центром управления сертификацией лекарственных средств Государственного управления по контролю за пищевыми продуктами и лекарственными средствами, на странице 258.
Существует два метода расчета. Один из них — использование приближенной формулы распределения Пуассона, то есть P (X >0)=1- e-Np>0,95, где P — это доверительный интервал, N — количество имитированных флаконов или партий, 0,1% (вероятность загрязнения).
Другой метод — более точная биномиальная формула, то есть P (X>0)=1-(1- X), где P — это доверительный интервал, N — количество флаконов или партий, и 0,1% (вероятность загрязнения).
На странице 259 книги представлена таблица зависимости между количеством имитационной упаковки, количеством загрязнений и вероятностью загрязнения при имитационной упаковке с 95% доверительным интервалом.

34. В пятьдесят девятом фильме на странице 72 раздаточного материала упоминается, что различия в процедурах заполнения среды в сходствах и различиях в процессе проверки порошковых инъекций, лиофилизированных порошковых инъекций и инъекций малого объема заключаются в основном в чем, как, где и откуда заканчиваются?
О: для асептических порошковых инъекций форма заполнения среды имеет определенную специфику. Если необходимо приготовить имитационный асептический порошок, добавьте жидкую среду во флакон с помощью шприца после упаковки; или разделите асептический порошок среды отдельно, добавьте стерильную инъекционную воду с помощью шприца после завершения. Однако цель состоит в том, чтобы исследовать степень асептической гарантии всего процесса асептической упаковки.

35. Как проверить герметичность контейнеров?
О: для проверки герметичности контейнеров часто используются физические и микробиологические методы. Физическое обнаружение имеет много преимуществ, таких как высокая чувствительность, удобство использования, быстрое обнаружение и низкая стоимость. В течение срока годности продукта физические методы тестирования могут использоваться для определения того, соответствует ли целостность упаковки установленным требованиям. Важная причина тестирования целостности упаковки заключается в обеспечении стерильности асептических продуктов.
Поэтому на этапе исследований и разработок упаковки продукта следует рассмотреть возможность использования теста на микробное проникновение или физического метода тестирования, который был проверен и более эффективен, чем обнаружение микробов, для обнаружения целостности упаковки продукта. Однако для теста на стабильность продукта в течение срока годности трудно провести тест на микробное проникновение, поэтому рекомендуется использовать физический метод обнаружения. Тест на микробное проникновение — это сложный тест для целостности окончательной стерилизующей емкости/системы укупорки. При проверочном тесте возьмите инфузионный флакон или флакон с пенициллином (флакон), залейте в него среду и стерилизуйте пробку и крышку на обычной производственной линии. Затем поверхность укупорки контейнера погружают в раствор с высокой концентрацией подвижных бактерий, извлекают проникновение микроорганизмов, культивируют и проверяют, чтобы подтвердить целостность системы укупорки контейнера. Одновременно необходимо провести тест с положительным контролем, чтобы подтвердить способность к росту питательной среды.

36. При использовании микробного погружения для проверки герметичности контейнера, почему предварительно снимают алюминиевую крышку, после снятия алюминиевой крышки остается только резиновая пробка, поэтому в ходе теста будет ли утечка жидкости и повлияет ли это на результаты проверки?
О: удаление алюминиевой крышки создает более жесткие условия. В лекции в качестве примера приводится лиофилизированная порошковая инъекция. Обычно внутри контейнера создается высокий вакуум, который не вызовет утечки. Испытатель может определить, применима ли процедура удаления алюминиевой крышки, в зависимости от характеристик своего продукта.

37. При проверке герметичности, например, при проверке герметичности алюминиевых барабанов, результаты не могут быть обнаружены с помощью проверки среды. Есть ли другой метод?
О: для контейнеров с асептическим сырьем рекомендуется использовать физические методы, такие как инфильтрация рассола.

38. Каков общий объем выборки на одну проверку на утечку и каков период перепроверки?
О: можно взять не менее 10 флаконов с начала, середины и конца линии укупорки для проведения теста, при начальной проверке следует исследовать герметичность в разные моменты времени в течение срока годности, а затем проверять один раз в год.

39. В руководящих принципах проверки есть требования к проверке герметичности инфузионных продуктов большого объема, но нет требований к продуктам в суб-упаковке и лиофилизированным продуктам. Не нужно ли проверять герметичность?
О: инъекции большого объема, инъекции малого объема, порошковые инъекции должны проходить проверку герметичности контейнеров.

40. Требуются ли испытания на герметичность контейнеров во всех лекарственных формах для инъекций, таких как ампулы и флаконы с физиологическим раствором?
О: испытание на герметичность контейнеров должно проводиться во всех лекарственных формах для инъекций, таких как ампулы и флаконы с физиологическим раствором. Однако используемые методы различны. В ампулах обычно используется физический метод испытания, а во флаконах с пенициллином — физические и микробиологические методы.